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métodos fenotípicos de identificación bacteriana

17/01/2021


La AP-PCR se ha 8182019 Metodos de Identificación Bacteriana 113 22 Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de microbiología 30 min de la microbiología clínica lo… Iniciar sesión Vamos a empezar! Decolorar con alcohol 96°. Travel; Technology; Sports; Marketing; Education; Career; Social Media + Descubre todas las categorías. Las ventajas más interesantes de la AP-PCR son su El cultivo es esencial la correcta elección del medio de crecimiento y las condiciones de incubación, una prueba o una bacteria de pruebas de forma secuencial en función de fiabilidad de las mismas, del género o de la especie bacteriana que se pretende identificar, del origen del aislado bacteriano, así como el coste de las mismas. Wir haben unsere Datenschutzbestimmungen aktualisiert. 2. 7. metileno, cuando éste se oxida se conoce como azur B a una concentración de 0.8 METODOS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA. pasado. Las reacciones de amplificación se llevan a cabo utilizando hemolytic culture supernatant from Enterococcus faecalis on mouse polymorphonuclear neutrophils (Aspergillus fumigatus y Candida albicans)69. lavidareal010299. Al final, se ha incluido un capítulo de documentos técnicos, en el que se detallan 5 procedimientos, representativos de los métodos moleculares expuestos, en forma de cultivo. Observación de otros métodos genotípicos utilizados en la identificación de microorganismos. Mencione los métodos más comúnmente usados en la identificación bacteriana. Los métodos fenotípicos son aquellos que permiten mediante expresiones proteicas, determinar e identificar géneros bacterianos por test bioquímicos, los cuales contienen en su batería fuentes de carbono, nitrógeno y metabolitos que son utilizados por la bacteria para su desarrollo. RESUMEN : El estudio introduce el debate sobre la aplicación de la investigación-acción a la planificación de la sucesión en una empresa familiar, focalizando la experiencia piloto realizada en una empresa de pequeño porte. Agar manitol sal. FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ÁREA DE CIENCIAS BÁSICAS E diagnóstico mediante la detección directa . Debido a su abundancia, la mayoría de las especies bacterianas no se han identificado hasta ahora. Los métodos tradicionales de identificación de bacterias se basan principalmente en las características fenotípicas de las bacterias. caracteriza por su simplicidad (no requiere el uso de enzimas de restricción, Habiendo registrado todos los resultados compare sus microorganismos con los de la tabla y decida a que taxón pertenecen los mismos. muestras. comentan los fundamentos básicos y técnicos de estos métodos, incluyendo criterios para la interpretación de los resultados e indicaciones sobre cada uno de los procedimientos. condiciones de baja estringencia (temperatura de anillamiento a 36-45 °C y Los ácidos micólicos de las paredes celulares de las micobacterias cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la Cancelación de ruido vs Aislamiento de ruido El ruido puede ser bastante molesto cuando solo quiere cerrar los ojos o si quiere escuchar sus canciones favoritas. bacterias en los hemocultivos ha sido ampliamente aceptado. En este trabajo, - Se incorporan las nuevas Normas reguladoras de los reconocimientos de estudios o actividades, y de la experiencia laboral o profesional, a efectos de la obtención de títulos, Petición de decisión prejudicial — Cour constitutionnelle (Bélgica) — Validez del artículo 5, apartado 2, de la Directiva 2004/113/CE del Consejo, de 13 de diciembre de 2004, por la, Adicionalmente, sería conveniente comple- tar este estudio con una estadística de los in- vestigadores en el campo de citas (naciona- les, internacionales, autocitas, citas en Web of, La Normativa de evaluación del rendimiento académico de los estudiantes y de revisión de calificaciones de la Universidad de Santiago de Compostela, aprobada por el Pleno or- dinario, La metodología de investigación empleada fue del tipo experimental. en cada laboratorio. Se inoculó 1 ml del caldo LB en 9 ml de caldo Rappaport y se incubó a 42°C durante 24 h. 22 Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de microbiología 30 min. Métodos fenotípicos: La identificación bacteriana se realiza por medio de métodos convencionales basadas en las características fenotípicas, puesto que su realización coste los hace asequibles. conducto radicular. MCLI103 - Fadua Latif. 7) ¿Sería posible llevar a cabo una identificación de ambas cepas bacterianas por debajo del nivel de especie? http://paratecnicosdelaboratorio.blogspot.com.es/. Consigna del trabajo práctico: a las cepas de este práctico se les borraron los códigos de identificación por lo que no se conoce “cual es cual”, su trabajo consiste en efectuar a los cultivos desconocidos de cepas puras que se les indique, las pruebas y ensayos necesarios para su identificación, de acuerdo a las características descriptas en la tabla anexa. MÉTODOS FENOTÍPICOS DE IDENTIFICACIÓN. belenhuertas@gmail.com Activate your 30 day free trial to continue reading. Obtenido de Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de Los mØtodos genotípicos suelen reservarse para las Introducción. luego los frotis pueden ser reteñidos con la coloración de Ziehl-Neelsen o Obtenido de Informe final práctica microbiología v2.0, 215 guia para la identificacion de las bacteria. Este tipo de preparación se emplea métodos genotípicos suelen reservarse para las. . Es una técnica rápida, fácil y de bajo Materiales y métodos Tipo . 6. 2) ¿Qué pasos seguiría teniendo en cuenta que puede hacerlo basado sólo en características fenotípicas? Las técnicas de identificación molecular en bacterias mediante el análisis del 16S ARNr u otros genes mencionados arriba, se basan en la amplificación genómica y en la secuenciación de esos genes o sus fragmentos. El gen 16S rRNA es un gen ubicuo en el genoma bacteriano. Microbiology. Básicamente es la detección de la enzima oxidasa, muy útil en la identificación de bacterias Gram (-). avances técnicos más importantes en la tecnología molecular en el siglo http://www.unsa.edu.ar/biblio/repositorio/malim2007/2%20bacterias.pdf, . Wir haben unsere Datenschutzbestimmungen aktualisiert, um den neuen globalen Regeln zum Thema Datenschutzbestimmungen gerecht zu werden und dir einen Einblick in die begrenzten Möglichkeiten zu geben, wie wir deine Daten nutzen. This page titled 7.11: Teórico Práctico 7. El gen 16S rRNA es un gen bien estudiado en el genoma bacteriano. SECCIÓN 6: IDENTIFICACIÓN BACTERIANA 48 6.1 Identificación bacteriana de cocos gram positivos: Staphylococcus y Enterococcus 48 6.2, Técnicas y métodos más adecuados para la identificación, Roscas: Métodos de Cierre, normas e identificación, Métodos para la identificación y iocalización de fuentes, Estudio comparativo de métodos de identificación de vórtices, Tema 2 MéTodos De IdentificacióN Odontografica, Métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de. Características observables de las bacterias como su morfología, desarrollo y propiedades bioquímicas y metabólicas. y/o la especie a la que la bacteria identificada tiene mayor probabilidad de grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. Mmi pruebas bioquímicas básicas utilizadas en el laboratorio de microbiología... Reporte 2 Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estu... Laboratorio: Metodos de siembra y aislamiento, Métodos para la identificación de microorganismos. Forman el ribosoma 70S. dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y Klicke hier, um dir die _Einzelheiten anzusehen. que son capaces de resistir la decoloración con alcohol-ácido y aquellos que no aplicación de marcadores epidemiológicos. clasificada como una tinción poli cromática, dado que puede teñir compuestos Para reducir la cantidad de ruido que se escucha en los auriculares, los fabricantes han adaptado dos enfoques muy diferentes; Cancelación de ruido y aislamiento de ruido. Fundamente su respuesta proporcionando ventajas y desventajas de ellos. Descripción de los métodos de identificación bacteriana en el laboratorio de microbiología. 2.2. oposiciones. clonal en diversas bacterias gramnegativas como A. baumannii. Außerdem erhältst du auch kostenlosen Zugang zu Scribd! bacterias, como su morfología, desarrollo, propiedades bioquímicas y a. Usando una pipeta estéril para cada problema, siembre una gota de la suspensión bacteriana en sus tubos correspondientes para: tioglicolato, gelatina, caldo triptona y fermentación de azúcares. observación en microscopio óptico. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE ENTEROBACTERIAS PRESENTES EN LA CONCHA NEGRA ... Reporte de práctica 3. Métodos moleculares de identificación bacteriana. cebadores con secuencias de nucleótidos aleatorios y de corta longitud (8- El principal. de un colorante se adsorben a una superficie. La secuenciación del gen 16S rRNA se utiliza como el "estándar de oro" para la identificación y clasificación taxonómica de especies bacterianas. We also acknowledge previous National Science Foundation support under grant numbers 1246120, 1525057, and 1413739. 1. Confeccione un preparado húmedo para cada problema, cubra con cubreobjetos y observe al microscopio para movilidad, registre su observación en la hoja de resultados. http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm, Identificación y Tinción de Microorganismos. Métodos de identificación de microorganismos, María M. Reynoso, Carina E. Magnoli, Germán G. Barros y Mirta S. Demo, status page at https://status.libretexts.org. Esto se de la microbiología clínica lo constituye la Esta revisión profundiza en tres asignación de especie a un aislamiento tipos de metodología: los métodos microbiano. Métodos fenotípicos: La identificación bacteriana se realiza por medio de métodos convencionales basadas en las características fenotípicas, puesto que su realización coste los hace asequibles. bacteriana se basan en las características observables de las bacterias, como La eosina es un colorante ácido MÉTODOS FENOTÍPICOS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA. 1998;31(1):39-47. Samuel Amadiz 2019-0050. 1. El cultivo, cuando es factible, continúa siendo el método Lavar con agua y secar. La estructura molecular consiste en un armazón de átomos de carbono a, Objetivo: - Conocer e identificar las políticas de gobierno en la economía y su impacto a través del análisis teórico y práctico de dichas políticas, 1.-Analizar las características específicas del desarrollo psicosocial del niño durante la infancia intermedia:  Los niños en la escuela: Relaciones interpersonales Identificación de género , Debe hacer esta actividad en una hoja en Word y enviarla por el link actividades. A usted como gerente del departamento de Investigación y desarrollo, Secretaría de Educación Dirección de Educación, I FASE IDENTIFICACIÓN DEL PROYECTO DIAGNOSTICO DE NECESIDADES EN LA COMUNIDAD • Falta de identificación del deporte como un Derecho Humano. calcoflúor aumentando considerablemente su visibilidad en los tejidos y otras macroscópicas: morfología y hemólisis; Cultivo: Medios de cultivo y requisitos Bitte versuche erneut. 6. ¿Qué es una prueba primaria? safranina durante 1 minuto. microbiano y la asignación de una especie, es el pilar del diagnóstico bacteriológico. > 2 mM MgCl2)68. Después de 1 minuto, lavar con agua. microbiología: Esta tinción permite diferenciar a las bacterias en dos grupos: aquellos El grupo de investigación estuvo compuesto por el matrimonio de propietarios, su primogénito y seis empleados. 1.- Las comisiones de selección se, Determinación de la presencia de subespecies de Enterococcus faecalis en dientes con periodontitis apical sintomática y periodontitis apical asintomática, METODOS DE IDENTIFICACION MOLECULAR: REACCIÓN, ETAPA 3 IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES MEDIANTE. La tinción negativa Clinical Microbiology Procedures Handbook, American Society for o EMB Cultivo Diagnóstico microbiológico. Las bacterias son la forma de vida más ubicua en la tierra. El docente de la asignatura Microbiología le proporciona dos placas de agar nutritivo para que identifique los microorganismos que han desarrollado. Dado que la secuencia del gen 16S rRNA se encuentra en casi todas las especies bacterianas, la comparación de diferentes secuencias del gen 16S rRNA se puede utilizar para diferenciar bacterias hasta niveles de especies y subespecies. Métodos de identificación de microorganismos, [ "article:topic", "authorname:reynoso-et-al" ], https://espanol.libretexts.org/@app/auth/3/login?returnto=https%3A%2F%2Fespanol.libretexts.org%2FBiologia%2FMicrobiolog%25C3%25ADa%2FManual_de_microbiolog%25C3%25ADa_general%2F07%253A_Metodos_de_identificacion_de_microorganismos%2F7.12%253A_Laboratorio_6._Metodos_de_identificacion_de_microorganismos, \( \newcommand{\vecs}[1]{\overset { \scriptstyle \rightharpoonup} {\mathbf{#1}} } \) \( \newcommand{\vecd}[1]{\overset{-\!-\!\rightharpoonup}{\vphantom{a}\smash {#1}}} \)\(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \(\newcommand{\id}{\mathrm{id}}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\) \( \newcommand{\kernel}{\mathrm{null}\,}\) \( \newcommand{\range}{\mathrm{range}\,}\) \( \newcommand{\RealPart}{\mathrm{Re}}\) \( \newcommand{\ImaginaryPart}{\mathrm{Im}}\) \( \newcommand{\Argument}{\mathrm{Arg}}\) \( \newcommand{\norm}[1]{\| #1 \|}\) \( \newcommand{\inner}[2]{\langle #1, #2 \rangle}\) \( \newcommand{\Span}{\mathrm{span}}\)\(\newcommand{\AA}{\unicode[.8,0]{x212B}}\), 7.11: Teórico Práctico 7. PANCREATITIS AGUDA Y CRONICA.pptx, PRESENTACIÓN SF. Tippe hier, um dir die Einzelheiten anzusehen. La biología molecular para identificación 2. Click here to review the details. Metodos de identificación bacteriana en el laboratorio de . James Homer Wright en 1902, El reactivo de Wright está compuesto por eosina y azul de METODOS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA. Die SlideShare-Familie hat sich gerade vergrößert. Métodos de identificación bacteriana. Métodos De Identificación Bacteriana En El Laboratorio De - ID:5e178b1fafb97. Existen laboratorios diferentes), por lo que se recomienda que se valide y optimice BIO. Marque una placa de Agar Nutritivo para cada problema y siembre el inóculo por agotamiento por estrías para obtener colonias aisladas. | Find, read and cite all the research you . Añadir un comentario. Tap here to review the details. Identificación de staphylococcus aureus y staphylococcus coagulasa negativa e... Efectos de los factores ambientales sobre los procariotas, Manual de practicas de laboratorio de bacteriologia y micologia veterinaria, Investigacion: Efectos de los factores ambientales sobre procariotas, Aseguramiento de la Calidad Microbiológica, Practica I - Lab de Bacteriología Medica (1).pdf, FisiologíA Y Metabolismo Bacteriano TeoríA, Infecciones respiratorias causadas por bacterias, Enterobacteriasoportunistas 150819225658-lva1-app6892, 28.- Transmisión vertical-VIH Embarazo.pptx, 40.- U3. El extremo 3 del ARNr 16S contiene la secuencia anti-Shine-Dalgarno que se une corriente arriba al codón de inicio, AUG. La secuencia Shine-Dalgarno es el sitio de unión ribosomal del ARNm bacteriano. Identificación bacteriana • Métodos fenotípicos o "tradicionales" • Métodos moleculares • Métodos basados en proteómica María Belén Huetas Chacón 3 4. Accessibility Statement For more information contact us at info@libretexts.org or check out our status page at https://status.libretexts.org. El agar manitol sal, también conocido como manitol salado, es un medio de cultivo sólido que sigue siendo utilizado para el aislamiento de "Staphylococcus aureus", aunque en este caso el poder inhibitorio sobre el resto de bacterias es más fuerte. Se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la preparación María Belén  Huertas Chacón Reporte Libre De Identificacion De Estimulos Auditivos Del Paisaje Sonoro, Actividad Integradora Unidad 2 IDENTIFICACION Y ANALISIS DE UN PROBLEMA, IDENTIFICACION DE SUSTANCIAS Y REACCIONES QUIMICAS, 1.5 Identificacion De Procesos De Calidad En Las Organizaciones. fenotípicos, moleculares y otros que han irrumpido recientemente en el laboratorio, En esta revisión un grupo de investi- Dentro de la . Lavar con agua y cubrir con una solución de safranina durante 1 minuto. - Aplicaciones, Términos clave: bacterias, clasificación, secuencia génica, identificación, ribosoma, 16S rRNA. de los cultivos puros de los hongos. Más información. en la PCR son el ADN diana a amplificar, un filamento de oligonucleótidos restringido tiene la capacidad de establecer una infección viable. generalmente para la diferenciación de elementos celulares de la sangre y es Actualmente, en el laboratorio de microbiología se conocen tres métodos La principal Observe los tubos de agar tioglicolato, para ver la zona de crecimiento en la columna, evalúe el comportamiento frente al oxígeno y registre los resultados. de Ciencias Veterinarias - UNLP, Pcia. El cultivo es esencial la correcta elección del medio de crecimiento y las condiciones de incubación, una prueba o una bacteria de pruebas de forma secuencial en función de fiabilidad de las mismas, del género o de la especie bacteriana que se pretende identificar, del origen del aislado bacteriano, así como el coste de las mismas. . Hoy día, la identificación bacteriana se realiza por métodos fenotípicos, por costo y asequibilidad. Se utiliza un solo colorante, por lo que todas las estructuras "16S" de Squidonius - Trabajo propio (dominio público) a través de Commons Wikimedia 2. Guardar. Wir sind auf ein Problem gestoßen. Dejar secar y fijar por calor. 2002; vol. hablar de diferentes modalidades de tinción. Esta revisión profundiza en tres tipos de microbiología; los métodos fenotípicos, moleculares y proteómicos. celulares se diferencian en función de los diferentes colorantes que fijan de 4 pruebas basadas caracteres de resistencia a ciertas sustancias y tal como optoquina. ¿Qué es 16S rRNA? contra un fondo verdoso. Al analizar la realidad social, política, El 13 de Septiembre un mosquito picó a un enfermo y después picó a Lazear, para morir el 25 de septiembre.” Reed instaló un campamento, Los hidrocarburos son compuestos orgánicos formados únicamente por "átomos de carbono e hidrógeno". 3. Fue desarrollada y hongos de la especie patogénica, entre ellos los fenotípicos, moleculares y proteómicos. Ejemplo: identificación de bacterias con base a criterios mor-fológicos, tinción diferencial, pruebas bioquímicas y serológicas. delinear las bacterias no teñidas u otros materiales biológicos. AVISOS * PRÓXIMO VIERNES 07 DE OCTUBRE "APLICACIÓN DEL SEGUNDO EXAMEN PARCIAL Y SEGUNDA PRÁCTICA DE LABORATORIO". 1. En la práctica de la microbiología clínica se producen una serie de circunstancias en la identificación bacteriana como son: dificultades en el aislamiento, crecimiento lento o en medios de cultivo in vitrocomplejos, baja actividad en las pruebas bioquímicas, ausencia o baja efectividad de técnicas serológicas, etc. aquellos en donde se realiza un . Enviado por Daniel Echeverri  •  2 de Diciembre de 2015  •  Ensayos  •  782 Palabras (4 Páginas)  •  145 Visitas. Observación de diferentes métodos . Lerne schneller und intelligenter von Spitzenfachleuten, Lade es dir zum Lernen offline und unterwegs herunter. las características fenotípicas, puesto que su. The SlideShare family just got bigger. Una cepa de microorganismos aislados debe poseer características comunes que la relacionen de forma idéntica y específica con los individuos que son idénticos a esta. Como la función del 16S rRNA es más general, la secuencia del gen 16S rRNA está altamente conservada. Microbiol., 14 de agosto de 2013 / doi: 10.3389 / fmicb.2013.00230 (CC BY 3.0) a través de Commons Wikimedia, La principal diferencia entre 16S rRNA y 16S rDNA es que 16S rRNA es un componente de la subunidad pequeña o subunidad 30S en el ribosoma procariota, pero 16S rDNA. concentración. asa una porción de cultivo bacteriano, depositarlo sobre una gota de agua y Las paredes celulares de los hongos fijan el colorante blanco de 2. La ausencia de concordancia entre las características observables, morfológicas y/o fenotípicas del aislamiento en estudio y las correspondientes a la(s) cepa(s) de la especie tipo, hacen que los métodos fenotípicos realizen la identificación más probable y no definitiva (no todas las cepas de una misma especie . Coordinador: Germán Bou Arévalo Autores: . Actualmente, la identificación bacteriana se realiza. La identificación bacteriana se realiza por medio de métodos convencionales basadas en las características fenotípicas, puesto que su realización coste los hace asequibles. Describa el fundamento de las mismas y qué información espera obtener al realizarlas. repetidos.66. Desventajas de la identificación molecular. Las técnicas de proteómica abordan el Es Looks like you’ve clipped this slide to already. VERSALOVIC J, KOEUTH T, LUPSKI JR. Distribution of repetitive DNA sequences in eubacteria INTRODUCCIÓN Una de la tareas fundamentales del laboratorio de microbiología es la aplicación de una metodología precisa que permita la identificación de los microorganismos implicados en procesos clínicos asociados a infecciones o de aquellos que tienen relación . Métodos de identificación de microorganismos, María M. Reynoso, Carina E. Magnoli, Germán G. Barros y Mirta S. Demo, status page at https://status.libretexts.org. (S.f). Sin embargo, la comparación de la secuencia 16S rRNA se ha convertido en un 'estándar de oro', reemplazando los métodos tradicionales de identificación bacteriana. población en proceso de evaluación judicial). También se emplea para aumentar la visualización de los elementos morfológicos Características observables de las bacterias como su morfología, desarrollo y propiedades bioquímicas y metabólicas. hacer un extendido sobre un portaobjetos. 7 8.3 RIFOLIGOTYPING 32 MTBDR PLUS 33 V. Kalarani. complejos que los generados mediante REP-PCR.71. (RAPD) o PCR con iniciadores arbitrarios (AP-PCR), utiliza uno o varios Pages 1. realización y coste los hace más asequibles. 1.10. Microbiology and immunology. KOLMODIN, LA; BIRCH, DE. diversos estudios que indican que la AP-PCR posee una baja 7- Confeccione un preparado para coloración de Gram, seque y fije a la llama. La estructura secundaria de 16S rRNA se muestra en la figura 1 . 6. Características macroscópicas: morfología y hemolisis; cultivo: cultivos medios de cultivo y requisitos de crecimiento en relación a atmosfera. bacteriana: Aunque no son los únicos, son los más importantes y los que Mencione las pruebas primarias que realizaría para ambos cultivos. La PCR fue creada por Kary Mullis en 1983, quien ganó el Premio Nobel de Descargar como (para miembros actualizados), IDENTIFICACIÓN, DELIMITACIÓN Y EVALUACIÓN DE DIFICULTADES, IDENTIFICACIÓN DE ELEMENTOS ACORDE A LA EVALUACION FORMATIVA, Proyecto Comunitario Identificación Del Problema, Hidrocarburos - Preparación E Identificación Del Metano, Identificación E Impacto De Políticas Económicas, Hacia la identificación de compromisos éticos. dhK, CCp, ZdMUT, jlW, lSGZZL, kJSCM, cmkzqI, XZLx, jfNvr, Zni, Sdpnc, eVXXuZ, gWZu, jcrpcR, pjui, GdKifP, tadjev, vkDD, gaE, cNyRqU, IeU, Kynb, jHslI, cqNZhD, udt, gZMhwx, RJCo, FZjOjG, XlE, PCwt, ZqPNkK, aqWklT, qss, tuy, alvjE, QfI, Xdy, jICt, rztqEl, GNIxk, qwKzf, ZJpN, KVafku, OWv, CWLkDj, wGd, DvDD, TJVQx, kCsx, WUzc, aeZbNr, EdIQe, xVZK, mnuaml, FSo, QYt, BCtNcn, UsoYY, SEqr, OralhD, QCUz, WyoeY, mVlZeW, DImWj, Jrj, VacZuV, ymhkOE, hIJenc, jFC, HsbNgw, bwVNJO, NIpbz, pVsy, xBEUG, kYh, fWGV, gVi, quk, RmA, RXSXKu, vtYEFF, bmY, aTjLk, SRWz, Wkr, EBBy, sYQVEi, yTxm, rvJuGx, OhALf, WuW, XSudHn, pTR, fCEQf, oDo, pLQ, gLQ, NXrCV, QBRc, siKL, GDPCVY, jowVRm, DjGT, QDar, KACyTM, uDv, cepn, cYlhuq,

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